移液有道 ——那些年你可能忽略的细节

移液器是实验室必不可少的移液工具，而且使用频率非常高，因此移液器的舒适度、准确性、安全性、耐用性非常重要。通常大家在使用移液器时非常注重：

• 人体工程设计，有效防止RSI（手部重复性肌肉劳损）；
• 可整只高温高压灭菌；
• 易拆卸和清洁等。

其实这些方面非常重要，却远远不够的。不信？来看看你是否也有这些疑问？


1. 如何对付特殊液体？

特殊液体是相对于水来说的，密度，黏度，表面张力等和水都有很大的差异。因此对于特殊液体的移取就需要辅助的移液技术。

• 反向移液 和正向移液不同，吸液时按钮压到二档，排液时只压到一档，对于移取粘稠或者挥发性很强的液体时，可有效补偿因为挂壁或者滴漏引起的误差。
• 预润洗 预润洗或者预润湿的目的就是在吸头内壁形成一层液体薄膜，可有效防止液体挂壁残留，此方法可以和反向移液结合使用。
• 密度调节功能 移液器出厂前显示窗口读数为“0”，适用于与水性质类似的液体移液；密度调节功能只适用于已测试的溶液，也就是说一旦密度调节功能启动，这把移液器就只能移取这种或者性质类似的液体；对于一种特定的液体，不同量程的移液器调节的位置也不同，即使同一把移液器，在不同量程使用时，调节的位置都是不同的。

当然具体在实验室使用时还有很多小窍门，比如移取甘油时可以将吸头嘴部减掉一段，移液效果就会好很多；移取易挥发的液体，容易滴漏，可以在移取之前将吸头在酒精灯上稍微灼烧，嘴部变小防止滴漏。对于气体活塞式原理的移液器具有一些天然的劣势，可以用外置活塞式取液器做补充。


2. 如何正确维护移液器保证其准确性、安全性和延长使用寿命？

除了学会正确使用移液器，维护移液器同样非常重要。

• 清洁 在移液器使用过程中，难免会发生污染。如果是外壳污染，用清洗剂或者醇类擦拭，最后用纯净水擦拭晾干即可；对于因操作失误引起的倒吸，液体进入移液器内，首先垂直拆卸，同样清洗后晾干即可，处理要及时，防止液体进入活塞或者弹簧。
• 消毒 因为实验要求的无菌操作，必须要求移液器灭菌处理，简单的办法是用75%的酒精擦拭就可以达到目的，并且可以在实验前放于紫外灯下照射消毒。对于更严格的操作，可能要移液器高温高压灭菌，湿热灭菌后一定要晾干，还要注意观察活塞上的硅脂是否均匀。
• 去除核酸污染 对于外源核酸敏感的实验，常常要对移液器做去除DNA处理，

方法如下：
清洗液：10×储存液的配置：
30.6g               NaCl
39.2g               Glycine
523ml               H₂O      
加1N HCl至1000ml

处理方法：

10×储存液稀释成1倍缓冲液，将移液器下半段拆卸下来的各部分，在95℃下浸泡30min ；用蒸馏水将各部分冲洗干净；在60℃下烘干处理或者完全晾干； 移液器完全冷却后组装。可见，移液器的化学耐受性也是需要考虑的关键因素。另外，组装移液器时大家会有体会，有些移液器零件过多，组装时容易出现遗漏和错装；有些移液器拆卸时需要特殊的工具，清洁维护的条件较为受限；而有些移液器既不需要额外的工具也无需组装过多的零件，维护保养起来非常方便。


3. 如何判断移液器是否处于正常使用状态？

在实验过程中，我们判断移液器的状态都是出了问题后发现的，比如出现漏气，倒吸，或者吸不动，打不净；亦或是发现移取1ml液体时明显不够才发现移液器有问题，所以平时除了对移液器保养之外，自己动手做校正也很重要。方法就是称重检测，需要万分之一天平、十万分之一甚至百万分之一天平及防蒸发装置，参照ISO8655的要求进行。如果大家感兴趣，下一次我们可以具体谈谈移液器校准的话题。当然对于精度要求更高的用户，不要忘了求助专业和有资质的检定机构。