奥斯陆案例分享：过继性细胞治疗的临床前开发

CAR -T细胞免疫疗法
在血液系统肿瘤治疗中取得了卓越的疗效，然而如何将CAR-T细胞治疗应用到实体瘤治疗领域仍有待进一步开发。
与血液瘤相比，实体瘤细胞治疗遇到的一个主要挑战是肿瘤微环境，包括：

- 某些趋化因子（如CCL2）硝化，抑制T细胞向肿瘤组织募集，从而被阻隔在肿瘤基质中。
- 肿瘤血管系统优先招募其他类型的免疫细胞，而非杀伤肿瘤的T细胞或NK细胞。
- 肿瘤低氧环境或某些细胞因子（如IFNβ）的产生导致免疫检查点分子或配体的表达上调。
- 肿瘤微环境中的一些代谢产物异常，影响T细胞或Treg细胞功能。
- 肿瘤相关巨噬细胞（TAM）抑制T细胞功能。
- 肿瘤相关成纤维细胞（CAF）通过ECM阻隔T细胞，使之无法进入肿瘤内。

肿瘤微环境导致的免疫抑制机制
 (Science. 2015 Apr 3;348(6230):74-80.)
 

在细胞治疗的临床前开发中，利用高通量活细胞成像技术，借助于体外3D肿瘤球模型有助于帮助我们在动物模型体内评估前，了解这些基因修饰的免疫细胞（包括CAR-T、TCR-T或NK细胞）的体外杀伤能力和安全性等，动态而直观地监测整个杀伤过程，这对很多研究人员非常重要。

———— 案例分享 ————

Translational Research Unit，Oslo University Hospital
 

 

奥斯陆大学国家医院的细胞治疗部门是欧洲最大、最现代化的学术性GMP设施之一，目前正在开展约10项临床试验。该转化研究中心主要从事CAR-T和TCR-T细胞治疗开发及其相关临床试验的免疫监测，以开发出高效的实体瘤细胞疗法，如骨肉瘤和卵巢癌。

在此次在线分享中，Pierre Dillard博士将具体介绍如何利用Incucyte实时活细胞分析系统，基于96孔板，对不同类型的效应细胞杀伤能力进行高通量动态检测，包括：

- 以3D肿瘤球模型为基础，评估TCR-T、TCR-NK和CAR-T细胞的杀伤能力
- 以更为复杂的可调3D cysts结构为靶标，评估CAR-T细胞的浸润和杀伤作用
- 检测抗肿瘤化合物不同剂量组合对3D肿瘤球的杀伤作用，以获得最佳的剂量搭配
- 在单细胞水平上，观察效应细胞和靶细胞的动态相互作用，以获得高分辨率的时间或空间维度信息
 

Incucyte实时活细胞分析系统


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-相关文献-
Dillard P, Kksal H, Maggadottir S M, et al. Targeting Telomerase with an HLA Class II-Restricted TCR for Cancer Immunotherapy[J]. Molecular Therapy, 2020.
Dillard P, Lie M, Baken E, et al. Colorectal cysts as a validating tool for CAR therapy [J]. BMC Biotechnology, 2020, 20.
Mensali N, Dillard P, Hebeisen M, Lorez S, Theodossiou T, Myhre MR, Fäne A, Gaudernack G, Kvalheim G, Myklebust JH, Inderberg EM, and Wälchli S. NK cells specifically TCR-dressed to kill cancer cells. [J]. Ebiomedicine, 2019.
Dillard, P., Köksal, H., Inderberg, E. M., Wälchli, S. A Spheroid Killing Assay by CAR T Cells. J. Vis. Exp. (142), e58785 (2018).