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色谱分析样品过滤时，滤膜是否会释放浸出物？
人阅读 发布时间：2021-05-13 16:53
针头滤器和滤膜是分析实验室的常用耗品，相信实验汪宝宝们都不陌生。在液相色谱检测之前，一般需要对样品和流动相进行预处理，除去颗粒杂质以保护色谱柱和仪器设备。样品过滤通常用针头滤器；流动相的预处理则通常用真空抽滤（全玻璃夹具+过滤膜片）的方法，可以从相应的溶剂中去除颗粒杂质，如沉淀物或灰尘，同时也可对流动相进行脱气。
色谱分析实验有时候会很伤脑筋，因为滤膜与流动相接触时，有可能会产生浸出物，对色谱分析产生干扰。比如，赛多利斯的科学家们最近做的一个研究，实验结果表明，再生纤维素RC膜不会释放浸出物，而聚酰胺PA (尼龙) 膜可能会释放少量的有机物。
在此项研究中，评估了再生纤维素RC膜和聚酰胺PA膜（尼龙）这两种常用滤膜在对液相色谱分析中常用溶剂/洗脱液进行过滤时，释放浸出物的可能性。使用经RC膜过滤的纯水和磷酸盐缓冲液作为洗脱液进行HPLC-UV/VIS和LC-HRMS分析时，谱图中没有出现杂峰。而在对经PA 膜过滤的洗脱液分析时，早期能检测到小的洗脱峰，这可能是聚酰胺低聚物导致的。即聚酰胺滤膜可能会释放少量的有机物，在其应用时应考虑这一点。
同理，在样品过滤过程中，针头滤器在与样品接触时也可能会有这样的风险。因此可见，再生纤维素RC膜是样品/流动相过滤的优选，因为它的有机化合物释放量极低，不会对分析结果造成干扰。RC膜材质纯净，并且化学兼容性广泛。不仅非常适合有机溶剂/混合溶剂的过滤，如DMSO 和酮类/酯类/醚类等常用有机溶剂均可过滤，同时也能过滤水溶液，是真正的多用途滤膜。
具体实验情况如何，让我们一探究竟吧：
实验滤膜： 0.2μm孔径的再生纤维素RC膜和聚酰胺（尼龙）PA膜
实验溶剂： 纯水、NaH2PO4缓冲液、纯乙腈三种溶剂，模拟要过滤的洗脱液
实验方法：HPLC-UV/VIS紫外可见分光光度法、TOC、高分辨率质谱（HRMS）
实验1
使用HPLC-UV/VIS来考察在常规分析中不同滤膜对于洗脱液过滤的影响
实验结果表明，总体来看，浸出物的含量非常低。
聚酰胺PA膜过滤的洗脱液，早期能检测到洗脱峰。RC滤膜的谱图与对照品并无差异。
实验2
分析纯水经再生纤维素RC膜或聚酰胺PA膜过滤后的TOC
实验结果表明，对照品及两种洗脱液提取物的TOC值均在≤200ppb（ng/mL）范围内，说明其有机污染物含量水平非常低。
不过通过PA膜过滤后的滤液的TOC值稍高，说明这些样品中有机物的含量稍高。
实验3
采用高分辨质谱法HRMS测定两种膜对乙腈的影响
过滤后乙腈的质谱如下图所示：
实验结果表明，洗脱液和对照品的所有质谱图只有微小的差别。
但在ESI正电离模式下所得的乙腈滤液质谱图显示了一些PA膜的小信号，这些信号可能归属为聚酰胺低聚物。
这个结果与该过滤膜材料的TOC和HPLC-UV/VIS结果一致。
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