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细胞分析 | 利物浦大学研究分享:小分子药物的摄取和转运

人阅读 发布时间:2021-07-08 16:04

众所周知,细胞膜很薄,大约只有5nm左右,从这个角度来看,一根头发的直径相当于大约10,000层细胞膜。然而,了解细胞膜的基本特征是否就能知晓小分子如何进出这些又薄又强大的细胞膜呢? 
 
人们以前认为,大多数药物通过“被动扩散”进入细胞,然而,“通过双分子层的y扩散”在细胞中真实发生的证据尚不足。这意味着要了解药物的分布、疗效和毒性,我们需要了解相关转运体的分布和它们在定量构效关系的特异性。有了这些,我们就可以解释大多数药物的分布(包括哪些药物穿过血脑屏障以及原因),以及为什么药物会失败。我们还可以靶向我们的目标药物。
 
图示大致按比例绘制的典型生物膜结构,表明典型的蛋白质:脂质质量比,以及小分子药物(阿托伐他汀,也按比例绘制)可能通过的方式,包括(A)双层脂质扩散,通过名义上不受蛋白质存在影响的双层区域,或者(B)通过转运体来实现中间代谢。(图来源:Front Pharmacol. 2014 Oct 31;5:231.)
 
接下来,让我们看看利物浦大学系统生物学的研究人员们如何研究小分子药物的摄取和跨膜转运
 
 
研究分享
 
University of Liverpool Case Study Podcast
 
来自英国利物浦大学(University of Liverpool)系统生物学讲席教授Douglas Kell博士带领他的小组成员分享他们如何使用Intellicyt® iQue Screener Plus开展各种项目,尤其重在关注小分子的跨膜转运,包括荧光小分子。凭借Intellicyt® iQue Screener Plus高通量、高度重复性和快速分析的特性优势,他们成功观察到各种细胞及其突变形式摄取荧光染料的能力。
 
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Justine Grixti博士研究员
 
研究项目:确定所关注的精神活性分子使用的转运体或转运蛋白,有助于研究药物不良反应、疗效和耐药性。
 
运用:使用一系列荧光染料处理哺乳动物细胞系,经药物处理后使用Intellicyt® iQue Screener Plus进行测定,再采用CRISPR-Cas9技术敲除所关注细胞的特定转运体,并分选出细胞。
 
 
Srijan Jindal博士后研究员
 
研究项目:在临床疑似尿路感染样本中开发一种快速、抗菌药敏检测方案。
 
运用:使用Intellicyt® iQue Screener Plus系统中不同的荧光和散射光通道对细菌进行计数,再进行抗生素处理。
 
Intellicyt® 的优势:
  • 高度重复性和快速分析。所有步骤仅需三十分钟,可作为一种快速检测方案应用于全科医生的手术,以便更好地诊断尿路感染患者。 
 
  
Jesus Enrique Salcedo Sora博士后研究员
 
研究项目:使用大肠杆菌研究膜生物学。
 
运用:得益于Intellicyt® iQue Screener Plus的高通量方式,使用流式细胞术筛选大量荧光分子,可在大肠杆菌中成功筛选出47或50种不同的荧光基团。
 
Intellicyt® 的优势:
  • 散射光阈值非常低,可检测到非常微小的细胞,比如长度仅约2微米的大肠杆菌。
  • 光学模块设计对用户非常友好,具备多个通道,其激发和发射波长都以标准化制定。
  • 超卓的优秀耦合荧光散射光系统,背景干扰少,有助于检测到来自细胞内的荧光信号。
 
 
  
Intellicyt® iQue3
更快速、更智能的流式细胞仪
 


 
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