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超纯水用作水溶性糖类的HPLC分析流动相的可行性

人阅读 发布时间:2021-07-08 17:16

HPLC作为一种使用液相色谱法分离、鉴定和定量物质的分析方法,所用的洗脱液必须有特别高的物理和化学纯度,而且不能含有悬浮的机械颗粒或任何溶解的物质。溶剂的质量对HPLC分析批的可靠性是决定性的。如果在梯度洗脱期间存在痕量污染物,也可能会导致出现“假峰或虚幻峰”。

那么问题来了,如何随时随地获取可靠的超纯水?又不用担心传统纯水存储风险?噔噔噔噔~Arium® Pro VF,一款更安全、更可靠、更便携的超纯水方案!

Overview
应用手册《用于HPLC分析的超纯水》验证了Arium® Pro VF所生产的超纯水用作水溶性糖类的HPLC分析流动相的可行性。样品与固定相之间的相互作用也不会受流动相的影响,其制成的超纯水的电导率为0.055 μS/cm,几乎可视为不含污染物。

因此,可随时按需制备的Arium® Pro VF超纯水可作为替代选项,用以制备HPLC分析的高纯度洗脱水,以用于食品分析、环境分析以及医疗、化学及生化研究及制药和生物技术行业的过程中质量控制测试,更会在不久的将来拓展到其他分离技术中,如反相色谱法、排阻色谱法或超高效液相色谱法。

 

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Arium® Pro VF超纯水系统说明

Arium® Pro VF系统设计主要目的是使用经过预处理的饮用水制备超纯水并去除饮用水中仍然存在的任何污染物。本论文所述研究中使用的Arium® Pro VF系统:

- 使用两种不同的滤芯,填充有某种特殊的活性碳吸附剂和一种特殊的混合床交换树脂,以交付TOC含量低的超纯水。

- 设有一个集成的紫外灯,在185nm和254nm的波长下分别有杀菌和氧化作用。

- 内置超滤柱模块,可用作交叉流过滤器,可截留胶体、微生物、内毒素、RNA和DNA。
- 在水出口处安装的0.2μm终端过滤器,起到去除颗粒物和细菌的作用。
 

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Arium® Pro VF超纯水系统流程示意图(为清楚起见,省略了阀门和控制器)


应用手册《用于HPLC分析的超纯水》对分离糖混合物的试验作了描述,这些试验均将使用Arium® Pro VF制成的超纯水用作流动相(洗脱液)。


实验结果
为了测定单个糖类型的截留时间,制备这些溶液并单次进样。由于不同的糖类会与固定相发生不同程度的相互作用,所以,具体的截留时间由RI检测器在每种糖通过柱之后记录一次。测定各个类型的糖之后,制备糖混合物并进行分离。单个糖组分彼此分离。不同截留时间的峰可分配给分析的单个糖样品。

 

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使用Rezex RNM糖类钠离子(8%)柱及超纯水分离单次进样的糖类样品和糖类混合物

黑色曲线:糖类混合物


此分析中使用的Arium®超纯水的电导率为0.055 μS/cm,而且基本上没有干扰性污染物,其用无峰的平坦基线表示(参见图中的绿色基线)。在分析批过程中,柱压力一直保持在23 bar (~334 psi)。

 

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2 μL的10 mM磷酸钾缓冲液、2 μL自来水及2 μL的Arium®超纯水色谱图


棉子糖标准品系统显示出最高浓度为0.015 mg/mL的线性曲线。通过生成基于峰面积的标准品直线,即可对样品定量,在棉子糖这个示例中也可以实现。

 

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棉子糖的标准品系列通过使用Arium®超纯水的Rezex RNM糖类钠离子(8%)柱

 

 

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